人胆管癌细胞运输和保存
可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式
(1)干冰运输,收到后立即转入液氮或者-80度冰箱冻存或直接复苏;
(2)存活细胞,收到后应继续生长,传代达到细胞生长状态良好时,再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。
(3)收到细胞后请拍照,3天内如果发现污染,请及时拍照与我们联系。
人胆管癌细胞接收操作说明
(重要:请在收到细胞后第一时间阅读本说明再进行操作)
购买者应具备一定的细胞培养知识与经验,实验室具备基本细胞培养条件,并按照细胞说明书相关要求进行操作。
收到细胞后确保细胞的培养条件一致,若因培养条件不一致导致细胞出现问题,责任由客户自行承担。细胞传代后请更换新的细胞培养瓶,不建议继续使用原提供的细胞培养瓶。
细胞接收操作:
1.由于细胞运输途中存在较多不可控因素(如温度变化,强烈振荡,时间较长,生长条件不适宜),可能出现漏液,污染,细胞漂浮及死亡等状况,因此请务必在收到细胞当天提供原始细胞图片。
图片拍摄步骤:收到细胞快递当日必须先着重对培养基拍第一组照片,观察是否有漏液和培养基是否颜色变浑浊,是否变异常,并显微镜下拍细胞100X,200X各两张,拍摄照片应清晰;第二组照片,未开瓶盖、未做任何处理把细胞培养瓶静置在培养箱2–4h后进行拍摄;第三组照片,细胞第一次传代后,如果细胞有问题,要每天都有照片记录下来提供给卖方。
根据提供的图片,本公司技术人员分析细胞确有问题,承诺免费提供一次;若未在规定时间限制内提供相关图片,默认收到细胞时细胞正常。
2.由于运输过程中的问题,细胞培养瓶中的贴壁细胞有可能从瓶壁中脱落下来,显微镜下观察会出现细胞悬浮的情况,这时请在拍照后将悬浮的细胞即时离心,加15%血清的完全培养基到新的培养皿/瓶继续培养3天;同时原培养瓶中剩下的贴壁细胞更换为15%血清的完全培养基,培养3天,3天后若原瓶或者新瓶中的细胞都没有出现增殖而是继续脱落死亡,请提供细胞图片跟进解决。(这里是针对原来完全培养基FBS浓度是10%的情况,如果原来FBS浓度是20%,可以增加到25%FBS浓度)
3.收到细胞时若无以上两种异常情况,请在显微镜下观察细胞密度,若为贴壁细胞,未超过80%汇合度时,将培养瓶中的培养液吸出,留5ml左右培养基(T25细胞培养瓶)继续培养;超过80%汇合度时,请按照细胞培养条件进行传代培养。
4.收到细胞,原瓶中的培养液若颜色正常,可以收集继续使用,在第一次消化传瓶时,建议留一瓶细胞继续使用我们的培养液,其他瓶的细胞可使用客户自己的培养液进行培养,这样可以减少由于细胞不适应培养液导致的问题,请按照细胞处理方法进行操作。