等温滴定量热(ITC)检测服务

等温滴定量热(Isothermal Titration Calorimetry,ITC)是一种在溶液体系中直接测量分子结合热效应的生物物理检测技术,能够在无需标记、无需固定的条件下对生物分子相互作用进行定量分析。ITC 通过记录滴定过程中产生的放热或吸热信号,可一次性获得 KD(亲和力)、ΔH(焓变)、ΔS(熵变)以及结合化学计量数 n 等关键参数,从而深入解析分子互作的驱动力与结合机制。该技术适用于蛋白-蛋白、蛋白-小分子、蛋白-多肽、蛋白-核酸等多种体系,尤其适合用于药物研发中的配体结合验证、机制研究与候选分子表征,为科研与创新药开发提供高质量的热力学数据支持。

检测特点

  • 无需标记

    • 样品不需荧光/化学修饰
    • 保持天然构象与活性
    • 避免标记引入的偏差
    • 结果更接近真实状态

  • 参数齐全

    • 一次获得 KD 亲和力
    • 同时输出 ΔH 焓变
    • 计算 ΔS 熵变与 ΔG
    • 支持 n 计量比解析

  • 溶液检测

    • 全程在溶液环境进行
    • 无需固定化或包被
    • 降低表面效应干扰
    • 更适合机制研究分析

  • 机制解析

    • 判断焓驱动或熵驱动
    • 揭示结合过程本质差异
    • 支持构效关系优化
    • 辅助候选分子决策

  • 结果直观

    • 热信号曲线实时可见
    • 数据拟合模型成熟
    • 参数输出清晰易读
    • 报告更具说服力

  • 设备先进

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常见问题解答

  • ITC 最大优势是什么?适合用来解决什么问题?

    ITC 的优势在于它能在接近真实溶液环境中直接测量结合热效应,因此可以在一次实验中获得亲和力与热力学参数(KD、ΔH、ΔS、n)。相比只给出亲和力的方法,ITC 更适合用于解释结合机制、比较不同分子或不同突变体的结合驱动力差异,尤其适合药物研发、蛋白工程与深入表征类项目。

  • ITC 能测哪些相互作用类型?

    ITC 可用于多种分子互作,包括蛋白–蛋白、蛋白–小分子、蛋白–多肽、蛋白–核酸等体系。特别是在小分子结合研究中,ITC 能提供焓驱动/熵驱动信息,对化合物优化与结构改造的方向判断非常有帮助。对于多位点结合或复杂机制,ITC 也能提供更丰富的解释空间。

  • 亲和力特别强(pM~nM级)还能测得准吗?

    亲和力非常强时确实更具挑战性,因为滴定曲线可能很快饱和,导致拟合窗口变窄、参数不稳定。针对这种情况,我们通常会通过降低有效结合强度(例如加入竞争配体、调低浓度、改变实验策略)来扩大可测区间,从而提高拟合可靠性。若仍不适配,也可以结合 SPR 等方法作为补充手段。

  • 缓冲液一定要完全一致吗?透析/换液必须做吗?

    缓冲一致性非常重要,因为只要滴定物与被滴定物缓冲差异明显,就会产生较强的稀释热或离子交换热背景,直接影响数据质量。一般建议做透析或缓冲置换,让两者处于相同体系,这样更容易得到干净的基线和可拟合的曲线。如果无法完全一致,也需要通过空白对照和实验设计来尽量扣除背景影响。

如您有任何问题,请联系我们。

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