一、公司介绍:
湖北艾普蒂生物工程有限公司专注于提供高品质的表面等离子共振(SPR)检测服务,业务覆盖多类分子间相互作用分析领域,包括:蛋白质与小分子药物、蛋白质与肽段、蛋白质与核酸、蛋白质与脂质、抗体与抗原等相互作用的亲和力及动力学分析,同时提供抗体人源化筛选、生物药表征、SPR 高通量化合物筛选及未知配体鉴定等特色 SPR 实验服务。
公司以 Cytiva 旗下 Biacore S200、T200 及 N200 系列 SPR 设备为核心实验平台,搭配由行业资深专家带队的技术团队,构建了从实验方案个性化设计到数据深度解析的全链条服务体系。我们独创 “项目专属技术顾问” 模式,为每一位客户配备全程跟进的技术专员,针对高校、科研院所、医疗机构及生物医药企业在生物分子互作分析中的差异化需求,提供灵活适配的解决方案。
依托设备性能优势与团队专业积淀,我们不仅确保实验数据的精准性与可靠性,更能通过定制化服务响应从基础研究到产业转化的全场景需求,助力客户在科研突破与产品研发中加速进程、提升效率。
艾普蒂生物MST检测优势
二、微量热泳动技术原理:
微量热泳动技术(MicroScale Thermophoresis,简称 MST)是一种基于分子在温度梯度中移动行为变化,分析生物分子间相互作用的技术,核心原理可拆解为以下关键步骤:
温度梯度的建立
通过红外激光在微小检测通道(通常几微升样本)中形成局部温度梯度,梯度范围内存在温度差(约 1-5K)。
分子的热泳动现象
所有分子在温度梯度中会发生定向移动(热泳动),移动速率受分子大小、电荷、水化层等物理化学性质影响。
结合事件改变热泳动行为
当目标分子(如蛋白)与配体(如小分子药物)结合时,其整体物理化学性质发生改变,导致热泳动速率变化。通过检测这种速率差异,可判断分子间是否结合及结合强度。
无标记优势
MST 无需对分子进行荧光标记或固定化处理,能在接近天然生理环境的条件下分析互作,最大程度保留分子活性,适用于复杂样本(如细胞裂解液、血清等)。
三、微量热泳动技术实验流程:
1、样本准备
制备待检测的生物分子(如蛋白质、小分子、核酸等),确保纯度和活性符合实验要求。
设计浓度梯度:固定一种分子(如靶蛋白)浓度,将另一种分子(如配体小分子)按梯度稀释(通常 8-16 个浓度梯度)。
混合反应:将梯度浓度的分子溶液混合,在适宜缓冲液中孵育(部分样本可直接反应,无需孵育)。
2、上样与检测
将混合后的样本依次注入 MST 专用毛细管中(单次样本量仅几微升)。
仪器启动:通过红外激光在毛细管内形成局部温度梯度,同时监测分子在温度梯度中的热泳动信号(如荧光强度变化,部分样本可依赖自身荧光或散射光)。
自动采集数据:仪器记录不同浓度下分子的热泳动速率差异,单次检测耗时通常为 10-30 分钟。
3、数据分析
软件自动处理原始信号,生成结合曲线,计算结合常数(Kd)、结合速率等参数。
验证结果:通过重复实验或调整缓冲液条件,确保数据稳定性和可靠性。
样本准备阶段
上样检测阶段
数据分析阶段