透射电镜

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品牌名称：艾普蒂生物

透射电子显微镜 (Transmission Electron Microscope, TEM)

透射电子显微镜（TEM）是一种利用高能电子束穿透超薄样品（通常70-90nm）进行成像的超高分辨率显微技术。电子束与样品原子相互作用发生散射，散射角度与样品的密度、厚度直接相关，从而形成明暗对比的显微图像。TEM 具备超高分辨率（0.1-0.2 nm）和超高放大倍数（0.2K-600K），可清晰解析光学显微镜无法企及的细胞超微结构（如线粒体、内质网、高尔基体、溶酶体、自噬小体、凋亡小体、叶绿体、液泡）及细胞内病原体（细菌、病毒）侵染状态与病理变化。此外，TEM 也是观察各类病原微生物（细菌、真菌）及纳米材料的强大工具。

核心优势：

纳米级分辨率：解析细胞器、病毒颗粒、纳米材料等细微结构。
超微结构成像：揭示细胞内部精细构造及病理改变。
广泛适用性：应用于生物医学（细胞、组织、病原体）及材料科学（纳米颗粒、晶体结构）。

主要应用领域：

细胞生物学、组织学、病毒学、病理学、分子生物学研究。
材料科学（纳米材料、晶体结构表征）。
外泌体、病原微生物（细菌、真菌）观察。

核心设备与技术参数：

设备名称	型号	关键特性与优势	主要技术指标
超薄切片机	Leica EM UC7	制备高质量超薄切片（70-90nm）的关键设备。	-
透射电子显微镜	HITACHI HT7800	• 第二代双隙物镜：无缝切换宽视野/低倍率观察与高衬度/高分辨率观察模式。 • 全数字化操作：配备高速高灵敏度CMOS相机，明亮环境下通过显示器完成所有操作，保护样品与操作者。	• 加速电压：120kV
透射电子显微镜	HITACHI HT7700	-	• 分辨率 (晶格)： 0.2 nm (120kV, off-axis) • 放大倍数： - 标准模式：200 ~ 200,000倍 - 高反差模式：4,000 ~ 600,000倍 - 低倍模式：50 ~ 1,000倍

服务流程：

样本接收：接收经 2.5%戊二醛充分固定的样本，核对编号，明确拍摄要求（目标区域、所需倍数）。
预实验：随机选取2个样本进行预观察（如有指定预实验样本需提前说明）。根据预实验结果确定正式拍摄方案。
正式拍摄：完成剩余样本的TEM观察与图像采集。

样本要求 (至关重要)：
固定剂：必须使用预冷（4℃）的 2.5%戊二醛（0.1M PBS, pH 7.35 配制）。注明配制/启用日期。
核心原则：快、准、冷、小：

快：离体后 1分钟内浸入戊二醛！动物处死后 5分钟内完成取材。使用锋利器械（新手术刀/双面刀片）快速切取，避免牵拉挤压。
准：精确切取目标器官及部位（如肾皮质、胰尾胰岛），注意方向性（如肌纤维纵/横切），组织块修成合适形状（见“小”）。
冷：全程0-4℃操作（冰上操作台，组织不可直接接触冰面以防结冰）。所有器械、溶液预冷。
小：
非定位组织 (如肝、脾、肺)： ≤ 1mm³ (理想尺寸 0.5mm x 0.5mm x 1mm)。
定位/有方向性组织 (如神经、肌肉、血管、肠、肾小球)：长条状 ≈ 0.5mm x 1mm x 3mm (确保观察面在长轴上)。

具体取材方法：

动物器官/组织：

浸入固定 (首选)：快速解剖取目标组织小块 → 置于冷戊二醛液滴上 → 立即修整至上述“小”规格 → 转移至足量冷戊二醛中（1.5ml EP管）→ 4℃保存（严防冻结！）。
灌注固定 (特定脑组织等，需经验)：风险较高，结果预判难。

培养细胞：

贴壁细胞：倒掉培养基 → 直接加足量冷戊二醛覆盖固定1h → 细胞刮轻柔铲下细胞 → 转移至离心管 → 500-800 rpm离心5min 成绿豆大小团块 → 小心吸去大部分上清（留~1ml） → 轻柔重悬 → 转移至EP管 → 垂直静置沉降1h → 小心吸上清 → 加新鲜冷戊二醛 → 4℃保存。(禁用胰酶！操作轻柔！)
悬浮细胞/细菌：直接转移至离心管 → 离心成团 (悬浮细胞/细菌：500-800/800-1000 rpm, 5min) → 后续步骤同贴壁细胞（吸上清、重悬、沉降、换新戊二醛、4℃保存）。(操作轻柔！)